高中生物实验知识：DNA的粗提取与鉴定实验

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一、不同试剂用途及原理比较

二、方法步骤比较

三、DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题

1.盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，细胞内DNA的含量比较少，如果被玻璃窖吸附却一部分，提取的DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。

2.获取较纯净的DNA的关键步骤。

⑴充分搅拌鸡血细胞液。DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。

⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。

⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min～10min。

3.本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。

⑴配制染色剂。用蒸馏水配制0.05%的溴化乙锭(EB)溶液。

⑵将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上，再滴1滴EB溶液染色。

⑶将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射(暗室中)，可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260nm处)。

4.典例解析

1.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中，说法错误的是

A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变

B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA

C.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂

D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应

解析：该实验依据的原理是A、B、D，DNA不溶于酒精(属有机溶剂)，C说法错误。

答案：C