①实验原理：蛋白质 ，其颜色深浅与蛋白质含量成正比。

②实验步骤

Ⅰ：将三份等量大豆种子分别萌发1、5、9天后取出，各加入适量蒸馏水，研碎、提取、定容后离心得到蛋白质制备液;

Ⅱ：取3支试管，编号1、2、3，分别加入等量的萌发1、5、9天的蛋白质制备液;

Ⅲ：在上述试管中(a)各加入等量的双缩脲试剂A液和B液配制的混合液，振荡均匀后，

(b)在沸水浴中加热观察颜色变化。

更正a： 。

b： 。

③实验结果：___________________________________________。

43.(12分)根据提供的实验材料，补充完善实验相关步骤。实验课题：生物制剂A对动物不同细胞的分裂具有促进作用。

实验材料：培养液、正常体细胞、癌细胞、A、胰蛋白酶。

(要求与说明：答题时不考虑加入A后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且培养条件适宜)

请回答：实验思路：

①取培养瓶若干个，分组如下：

a组：_______________________________________________

b组：_______________________________________________

c组：_______________________________________________

d组：_______________________________________________。

每组设置若干个重复样品。

②各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，各取其中的几个样品，加入 ，摇匀，在显微镜下用血细胞计数板分别计数并记录细胞数。

③重复②若干次。

④_____________________________________。

44.(3分)仔细观察下图，坐标中染色体数与核DNA数之比Y1和Y2依次为 ______、______，请在坐标图中画出细胞正常减数分裂过程中“染色体数与核DNA数之比”变化曲线图。

45.(15分)研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成

年个体的正常组织中___________(填“低表达”或“高表

达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图12所示。制备免

疫小鼠用的H蛋白(抗原)时，应构建___________区基因，

转入原核细胞表达并提纯。

(2)将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用的化

学诱导剂是______________，细胞融合的原理是_________________。

(3)将融合细胞在__________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。

将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的上清液，

应用____________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体

的杂交瘤细胞。

(4)将筛选得到的杂交瘤细胞，经过_______________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

(5)治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体____________的特点。

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