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照高效液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验
用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠溶液-乙腈(2：2：1)为流动相;检测波长为220nm.理论板数按吗啡峰计算不低于1000.
固相萃取柱系统适用性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充物;以测定法中相同的处理条件和洗脱条件试验。精密量取浓度为每1ml中含0.3mg的吗啡对照品溶液1ml，置处理后的固相萃取柱上，同法洗脱，用5ml量瓶收集洗脱液至刻度，摇匀。分别精密量取该洗脱液与含量测定项下的对照品溶液各10μl，依次注入液相色谱仪，记录色谱图。洗脱液与对照品溶液色谱图中吗啡峰面积的比值应在0.97-1.03之间。
测定法
取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3：1)15ml与水5ml冲洗，再用pH值约为9的氨水溶液(取水适量，滴加氨试液至pH值为9)冲洗至流出液pH值约为9，待用。取本品20片，精密称定，研细，精密称取约1片量，置磨口锥形瓶中，精密加5%醋酸溶液10ml，超声处理20分钟使吗啡溶解，取出，放至室温，滤过;精密量取续滤液1ml，置上述固相萃取柱上，滴加氨试液适量使柱内溶液的pH值约为9(上样前另取同体积的续滤液预先调试，以确定滴加氨试液的量)，摇匀，待溶剂滴尽后，用水约20ml冲洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脱，用5ml量瓶收集洗脱液至刻度，摇匀。精密量取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图;另取吗啡对照品适量，精密称定，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含吗啡0.06mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
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