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釉基质蛋白(enamel matrix protein，EMP)是牙胚发育过程中由上皮根鞘分泌的一组蛋白质，主要包括牙釉蛋白和非牙釉蛋白以及一些蛋白酶类和血清蛋白。其中，牙釉蛋白占其质量分数的90%，是EMP中促进牙周组织再生的主要活性成分。已知非牙釉蛋白有釉丛蛋白、釉鞘蛋白、釉蛋白和牙本质涎磷蛋白等，其质量分数虽然不足分泌阶段EMP质量分数的10%，但却在信号传导和矿化晶体成核过程中起着重要的作用。

1 釉基质蛋白的生物学功能

牙周炎涉及牙槽骨、牙周膜和牙骨质等牙周支持组织的破坏，常常导致牙丧失。1997年人们就发现，EMP除了在釉质形成中发挥作用外，在牙周组织再生中也发挥了重要的作用。研究显示， 牙周手术后应用EMP可以促进牙周组织再生，即EMP具有促进牙骨质形成、牙周膜细胞增殖和骨诱导的能力。釉基质衍生物(enamel matrix derivative，EMD)的生物学作用是通过刺激局部生长因子分泌和细胞因子表达而发挥的，如转化生长因子B 、血小板性衍生生长因子、白细胞介素6和胰岛素样生长因子等。EMD可明显促进人牙周膜细胞产生胰岛素样生长因子和转化生长因子B，的转录和表达网。

EMP除了对组织愈合、骨形成和牙根吸收有积极的作用外，还可用于根管、种植和创伤等治疗方面。此外，EMP还可用于直接盖髓术和促进釉质再矿化 。

2 釉基质蛋白的应用

EMP主要以牙釉蛋白的形式在临床牙周病治疗、牙种植和牙再植修复中得到应用。EMD的主要活性成分是牙釉蛋白， 至今尚未从EMD中分离出其他的活性成分。提纯的牙釉蛋白应用时产生的效果与完整的EMD一样I41。

2.1 牙釉蛋白的获得由于牙胚中牙釉蛋白的质量较丰富，因此牙釉蛋白常直接由牙胚提取。在2O世纪70年代就有研究者从牛牙胚中提取出牙釉蛋白并研究其性质，而后又有研究者分别用Tris法、生理盐水法、乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)法和乙酸法提取牙釉蛋白并进行比较，结果发现EDTA法提取的蛋白质的相对分子质量为6.7xl04， 乙酸法提取的蛋白质的相对分子质量在3.0xl04以下，符合牙釉蛋白的性质;而Tris法和生理盐水法只得到很微弱的蛋白质条带。

有研究者将乙酸法提取的主要成分是牙釉蛋白的EMP和EDTA法提取的主要成分是非牙釉蛋白的EMP以及牙釉蛋白提纯物分别用于猴子的人工牙周缺损处，8周后应用乙酸法提取的EMP和应用牙釉蛋白提纯物的部位无细胞性牙骨质几乎完全再生，且与牙本质连接紧密并有胶原纤维伸入新生牙槽骨;而应用EDTA法提取的EMP部位， 新生牙骨质非常少，牙槽骨的形成也很少，与空白对照组结果相似。这说明乙酸法获得的EMP和牙釉蛋白提纯物具有促进牙周组织再生的能力，而EDTA法获得的EMP却几乎没有促进牙周组织再生的能力。

束蓉等用改进的乙酸法提取了猪牙胚的牙釉蛋白并行十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳，结果显示其主要分子条带的相对分子质量为2.0xl0 、1.3xl04和5xl04， 印迹膜测序法鉴定其相对分子质量为2.0xl0 和5x10 的牙釉蛋白片段的N端的lO个氨基酸，表明提取物是典型的牙釉蛋白。

在牙釉蛋白基因研究的基础上利用生物工程技术， 已经能够人工重组牙釉蛋白，如重组大鼠的牙釉蛋白M179和rM166。殷春一f9l在人牙釉蛋白的真核表达方面也作了有益的尝试。

2.2 牙釉蛋白应用的载体应用载体的目的在于使生物活性物质滞留于局部，免除其过早流失或被体液中的酶降解而失去其生物学作用，同时也便于操作。对于牙釉蛋白，基于其本身的性质，国外研究者认为它合适的载体是丙二醇藻酸盐(propylene glycol alginate，PGA)。PGA是高黏性和酸性溶液， 易溶解牙釉蛋白，用到手术区后，牙釉蛋白可逐渐沉积到牙根面上。研究显示，PGA可在2 d内完全降解，但沉积并吸附到牙根面的牙釉蛋白却可以保留2周以上，从而发挥其生物学作用。束蓉等㈣采用壳多糖作为牙釉蛋白载体，在动物试验中也取得了良好的效果。

2.3 牙釉蛋白的应用方法瑞典的Biora公司研发的名为EMP的猪源性EMP药物于1996年获得美国食品与药品管理署认证。该EMP系猪源性牙釉蛋白与PGA的复合物， 临床应用时的操作类似于翻瓣术，只是在根面处理结束后通过注射装置在根面涂抹EMP，然后常规缝合软组织瓣， 常规术后维护。Lekovic等将牙釉蛋白与植骨术联合应用于牙周组织再生，后来还将牙釉蛋白、植骨术和引导组织再生术(guided tissue regeneration，GTR)联合应用，结果都取得了显著的疗效。

3 釉基质蛋白的疗效

3.1 在牙周组织再生中的作用牙周病治疗的最终目的是使牙周组织获得再生并形成新的附着，包括牙槽骨、牙骨质和牙周膜的再生。EMP对与牙周组织再生有关的牙周膜细胞、成骨细胞、成牙骨质细胞和骨髓基质细胞有不同的作用， 进而可促进牙周组织再生。

用EMP治疗牙周骨下袋可以促进牙周组织再生，即牙骨质、牙周膜和牙槽骨的再生，从而使探诊深度降低，临床附着获得，且疗效可维持l0年之久[1]。Haze等㈣用犬建立试验动物牙周炎模型发现，重组人牙釉蛋白可以促进间充质干细胞的增殖并分化成牙骨质、牙周膜和牙槽骨，从而导致牙周支持组织再生。

Chambrone等[21将10位志愿者的38处牙周骨下袋随机分成2组，试验组在进行翻瓣术后局部应用EMP，而对照组只进行翻瓣术。经过2年的随访发现，与对照组相比较，试验组探诊深度明显降低，临床附着水平也发生了明显的改善。

A1一Hezaimi等 在5只成年母犬的上颌尖牙以及第二、第四前磨牙造成颊侧牙周组织骨缺损，试验组的15个缺损区应用EMD处理，而对照组的l5个缺损区则不应用EMD处理。4个月后通过组织学检查发现，试验组有矿化牙骨质形成并覆盖在原有的牙骨质上，且新形成的牙骨质中存在着牙骨质基质陷窝和胶原纤维束，而对照组则没有任何牙骨质形成。另有研究发现，在骨缺损修复的早期阶段中存在EMP的表达和分泌。

Khedmat等证实，EMP可明显促进人牙周膜成纤维细胞的分裂和增殖，且作用效果呈剂量依赖性。此外还有研 例证实，EMP可促进牙周膜干细胞和骨髓基质干细胞增殖和分化，可提高干细胞总蛋白质的合成、碱性磷酸酶的活性和矿化结节的形成，且作用效果呈时间和质量浓度依赖性。对于牙周骨下袋除了应用EMD外，GTR和骨移植也可促进牙周再生。与GTR相比较，应用EMD后牙龈退缩较明显，但其余作用效果与GTR相似。

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