编辑:sx_yangk
2015-04-08
健康清洁级家兔30只,雌雄兼有,体重2.5~3.0 kg。术前均行裂隙灯检查及眼压测量,眼前节正常,眼压为1l~20 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。 以下就是由威廉希尔app 为您提供的家兔角膜内皮细胞的表达研究。
所有动物的饲养及处死均按照NIH的《实验动物管理及使用指南》进行。
卡波姆(Carbomer一940,美国古立德化学公司);质量分数0.15%地塞米松(江苏连水制药厂);SABC法免疫组织化学试剂盒、AQP一1多克隆抗体(武汉博士德公司);Trizol一步法组织总RNA提取试剂盒、一步法逆转录聚合酶链反应(one-stepreverse transcription polymerase chain reaction.RT-PC R)试剂盒(美国Invitrogen公司)。
3O只家兔按完全随机原则分为5组,分别为对照组,2、3、4、5周组,每组6只。家兔经25 g/L异戊巴比妥钠60 mg/kg耳缘静脉注射进行全身麻醉,质量分数0.4% 盐酸奥布卡因滴眼液点眼2次进行表面麻醉,实验组用1 mL消毒空针自家兔左眼角膜缘内1 mm刺入前房,抽出房水0.2 mL,注入0.2 mL复方卡波姆溶液(含质量分数0.3% 卡波姆和0.025%地塞米松)制作高眼压模型。对照组左眼同法注入平衡盐液0.2 mL.术毕,双眼点用氯霉素滴眼液。造模后每日测量眼压1次,裂隙灯下观察眼结膜、角膜及虹膜等的反应。将H艮压升高至>22 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),并能持续1周以上者为高眼压模型制作成功。建模后2周,处死对照组和2周组动物,3、4、5周时分别处死相应组动物,摘除左眼眼球。各组取3只眼球储存于一70℃ 冰箱中用于RT-PCR检测;另外3只眼用质量分数4% 多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋,用于免疫组织化学检测。
编辑老师为大家整理了家兔角膜内皮细胞的表达研究,希望对大家有所帮助。
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