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目的要求

1.了解实验原理。

2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。

3.通过本实验培养实验操作能力和观察能力。

实验原理

1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。

当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA.

3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

注意事项

1.步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。

2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。

实验用具

鸡血细胞液(5～10 mL);体积分数为95%的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2 mol/L和0.015 mol/L的NaCl溶液，二苯胺试剂;烧杯(100 mL，1个， 50 mL， 500 mL，各2个)，漏斗，试管(20 mL，2个)，玻璃棒，滴管，量筒(100 mL，1个)，纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。

课前准备

制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500 mL烧怀中，注入新鲜的鸡血(约180 mL)，用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。(也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。用吸管吸去上清液。

板书：(课前写好)

实验十一 DNA的粗提取与鉴定

实验原理：

1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA.

2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA.

3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。

方法步骤：

1.提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min

2.溶解DNA：

3.析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢

4.过滤：取黏稠物

5.再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min

6.过滤：取滤液。

7.提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min

8.DNA的鉴定：沸水浴5min

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