35. 图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、  ↓GATC、CCC↓GGG。若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子Dd分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有几种不同DNA片段?若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，应选用哪种限制酶?

A.4 ;MboⅠ       B.3; MboⅠ     C.4; BamHⅠ       D.3 ;BamH

36、应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是(　　)

A.图中①过程需要的工具酶是限制酶和DNA聚合酶

B.图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料

C.将PrG导入细胞Ⅱ，则Ⅱ最可能是浆细胞

D.图中①～⑤过程中不是都发生了碱基互补配对现象

37.无论是植物细胞，还是动物细胞，都可以利用一定的方法诱导融合，可用模型图表示细胞融合技术的一些过程，有关叙述错误的是 (　　)

A.若该过程表示植物原生质体的融合，则甲、乙细胞可用酶解法获取

B.若该过程表示体外受精，则甲、乙细胞都需要经过准备阶段

C.若该过程表示制备单克隆抗体，则丙细胞是杂交瘤细胞

D.以上三个过程可以用同一种诱导剂诱导融合

38.为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传。据图分析，不正确的是(　　)

A.过程①的自交代数越多，纯合高蔓抗病植株的比例越高

B.过程②可以任取一植株的适宜花药作培养材料

C.过程③包括脱分化和再分化两个过程

D.取F1花药离体培养得到纯合高蔓抗病番茄植株过程中，必须使用生长素使染色体加倍

39.下列有关受精作用及胚胎发育的说法中，不正确的是(  )

A.受精卵中染色体，来自父母双方的各占一半

B.防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和卵细胞膜反应

C.受精过程中体现了细胞膜信息交流的功能

D.胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化

40.图甲表示某环型DNA分 子经限制性核酸内切酶(EcoRⅠ)完全酶切后的片段电泳结果若改变条件使其酶切不充分就有可能获得如图乙所示的电泳结果(Kb即千个碱基对)。下列叙述错误的是(   )

A.该DNA 分子全长至少为7Kb，该DNA分子中至少含有4个EcoRⅠ酶切位点.

B反应时间越长，得到图甲结果的可能性越大

C.限制性核酸内切酶主要来自原核生物，化学本质都是蛋白           质。

D.适当增加EcoRⅠ浓度，更可能得到图乙的结果。

二、简答题

1.(11分)绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因，可以合成一种抗TMV蛋白，叶片 对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如下图所示。

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中①过程表示________。

(2)合成的目的基因还需要通过PCR技术进行扩增，过程如图

①加热至94℃的目的是使DNA样品的       键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过

酶的作用来完成的。

②新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同是因为DNA复制的原理是

③PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的(    )

A.白细胞DNA   　   B.病毒蛋白质 　    C.血浆抗体  　  D.病毒核酸

(3)由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是        ______               基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________。

(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加________，以保证受体细胞能培养成再生植株。

(5)绞股蓝的基因之所以能接到烟草植物中去，原因是_________________。

(6)过程⑥可采取_______________________的方法，检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过__________的方法来确定植株是否具有抗性。

2、(15分)科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如下三组实验如图2.。据图回答下列问题：

(1)实现过程②的技术是                   ，在此之前使用                  酶处理细胞以除去细胞壁。过程③原生质体经过             再生，与此密切相关的细胞器为_             。

(2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的             存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄-马铃薯”细胞内含________条染色体;若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四 倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株 属于________倍体植株。

(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是                                       。

(5)若杂种植株在有丝分裂在过程中，仅保留番茄的染色体而马铃薯的染色体会不断丢失，采用特异性引物对番茄和马铃薯基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图3是用该引物对双亲及4棵再生植株1～4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有(多选)

(6)图2 Ⅰ过程培育植物体A主要应用了                 技术。

(7)用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，培育植物体B的方法(Ⅱ)称为_________________________。植物体C的基因型有_______________________。(细胞A为两两融合细胞，写出具体的基因型。)

(8)三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是_______

3.(11分)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

请回答

(1) Y、Z细胞的名称分别是________、________。

(2)①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较大。

(3)③过程中需用到的生物诱导剂是_____________________。

(4)④处需要筛选，其目的是___________________________。

(5)得到的Z细胞可进行体外培养或者在________培养，前者需用_______对Z细胞处理，使之分散开，否则在培养过程中会出现______________。

(6)对健康人进行该传染病免疫预防时，可注射图中基因工程生产的         所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行

比较;或用图中的         进行特异性结合检测。

4.(13分)科学家采用不同方法培育良种牛的过程.请据图回答有关问题：

(1)与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植的优势是_______________________。在上图中对良种奶牛处理所用的激素是_______________处理的目的是____________。

(2)“转基因牛”D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是

_____________________________， h过程的常用方法是________________。

(3)c→d过程需要注意的是________________________________其原因是_______________________________。

(4)从图中的_________(选图中数字)最可能获取ES或EK，它的形态特征是______________________，

(5)图中的转基因牛D可以通过分泌乳汁来生产基因药物。在构建的相应基因表达载体中，外源基因的首端必须含有使其仅能在牛乳腺细胞中特异性表达的___________，人们通常将此类转基因动物称为________________________。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定，一般是取处于囊胚时期的__________细胞进行检测。

(6)图中奶牛的牛粪可以用于生产沼气，沼气工程利用的是生态工程的_________________原理。

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