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2016-03-09
3、三种常用灭菌方法的比较
灭菌方法 |
灭菌条件 |
灭菌时间 |
适用材料或用具 |
灼烧灭菌 |
酒精灯火焰的充分燃烧层 |
直至烧红 |
接种环、接种针或其他金属工具 |
干热灭菌 |
干热灭菌箱内,160~170℃ |
1~2 h |
玻璃器皿(吸管、培养皿) 和金属用具等 |
高压蒸汽灭菌 |
100kPa,121℃ |
15~30 min |
培养基等 |
4、微生物的纯化培养
包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段,纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后,就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。
稀释涂布平板法:将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。
5、微生物的分离和计数
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
①筛选菌株:利用选择培养基筛选菌株。
②测定微生物数量的常用方法:统计菌落数目和显微镜直接计数。
③土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
(2)分解纤维素的微生物的分离
①实验原理
即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
②流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。
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