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教学媒体教学方法

教师行为

学生行为

5分钟

由专题一涉及到的葡萄酒引题（图片）

同学们好，大家看这些图片（ppt展示），知道是什么吗？对，但这可不是一般的葡萄酒啊，这是法国葡萄酒。作为世界葡萄酒的极品，法国葡萄酒不仅是因为其与香水、时尚作为法国浪漫的象征，更是因为它具有悠久的酿酒历史。那这些酒是怎么酿成的，我们在专题一的时候已经讲到过了，是。。。那这些酿酒酵母要怎么去获得呢？大家知道，酿酒酵母是一种微生物，对吧。所以呢，这就涉及到了我们专题二的学习，微生物的培养与应用，来学习一下如何进行微生物的培养，微生物还有一些什么应用呢？首先，今天我们要来学习一下，本专题最基础的一种技术，微生物的实验室培养。

回答：葡萄酒

。

回答：葡萄经过酿酒酵母的发酵

15分钟

ppt展示讲解

结合ppt图片

首先，大家思考，我们要进行微生物的培养，首先要有什么条件，好比我们要种一棵树，首先需要什么？那树要种在哪呢？对，由此想到，我们微生物是不是也需要一定的生活土壤？答案是肯定的，这个土壤呢，就是我们的培养基。人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，就是培养基。大家看这些，就都是我们实验室常用到的培养基，大家可能发现了，有些培养基是液体的，对吧。其实呢，我们的培养基有各种各样的，针对不同的生物呢，我们要用适合于它生长的培养基，所以呢，关于培养基的分类，目前呢，主要有三种，一是依据它的物理状态进行分类，有固体培养基、液体培养基，还有半固体培养基；二呢，是依据它的用途分为鉴别培养基和选择培养基。鉴别培养基呢，顾名思义，就是是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。比如我们以后会用到的大肠杆菌鉴别培养基等。而选择培养基呢用来促进或抑制一定类型的生物体(如细胞或细菌等)而设计的培养基。比如我们课题二将要用到的分离土壤中分解尿素细菌的培养基就是一种选择培养基。通过定义，大家能发现选择培养和鉴别培养基的区别吗？ 大家站起来说一下。选择培养基上只能存活一种微生物，其他被杀死，而鉴别培养基呢，上面有许多微生物，只不过有一种微生物被化学试剂标记出来了。培养基的分类呢，还有第三种分类方式，按成分进行，分为天然培养基和合成培养基，天然培养基就是含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物。合成培养基呢， 是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的，其所含的成分（包括微量元素在内）以及他们的量都是确切可知的。

学习了关于培养基的分类，那培养基中应该加入些什么物质呢？大家可以小组讨论一下，一分钟后，叫大家谈一下自己的观点。好了，大家都说了这么多，老师总结一下，大家的一个普遍观点是微生物需要什么就加什么，是吧。好拿微生物需要什么呢？需要水，还要有提供碳素的物质，我们把它叫做碳源，那还有氮源，还有无机盐，还有什么？这些都是普遍的微生物所需要的，那有没有特殊的呢？还有些特殊的微生物呢，需要加入它生活所需要的一些特殊物质。总之一句话，需要什么就加什么。那是不是具备这些微生物就能很好的生长呢？不是的，还需要有合适的pH值，合适的氧气供应量等其他条件的控制。

回答：树

回答：土壤

热烈讨论

热烈讨论，各抒己见

10分钟

穿插故事，引发思考

ppt展示

现在呢，大家思考，具备这些条件，微生物是不是就能健康的生长呢？现在呢，再让我们回到19世纪中期的法国，这个世界酿酒业的摇篮，但这个时候呢，关系到法国经济命脉的酿酒业却曾一度遭受毁灭性的打击，他们发现啊，在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。大家想这是怎么回事呢，当时他们也是严格的按配方配制培养基，那为什么还会出现这些问题呢？但是，他们就找到了大科学家巴斯德，巴斯德经过研究后发现啊，在变坏的酒中多出了一种物质，经过研究发现，正是这种物质产生出了酸性物质导致葡萄酒酒变酸，最终他得出结论，倒是生产失败的根源在于发酵物种汇入了杂菌。所以这就启示我们，在进行微生物实验培养时，还需要注意。。。对，要求我们要进行无菌操作。那具体要涉及到哪些方面呢，老师这里呢列出了一些，大家看一下， a.对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

b.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养皿等进行灭菌。

c.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

d.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

我们要注意一点，就是和微生物接触的每一个环节，都必须进行严格的灭菌，消毒操作。

我们从上可以发现，有些步骤提到的是灭菌，有些是消毒，那灭菌和消毒到底有哪些区别和联系呢？大家先阅读一下课本上关于两者之间的定义和各自的一些常用方法，然后小组讨论总结一下消毒和灭菌的联系和区别。大家说了以后，教师总结。首先我们来看一下定义，消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌则指使用强烈的理化因素杀死物体内所有的微生物，包括芽孢和孢子，以达到完全无菌的过程。通过定义我们可以知道，消毒和灭菌都可以杀死微生物，但灭菌更为猛烈，可以杀死全部微生物，而消毒则温和一点，杀死部分微生物。正是因为他们的不同，我们在微生物实验培养过程中，会在不同时候分别对它们进行运用，下面呢，我们再来看一下他们具体的一些方法。消毒的方法:a、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min。b、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min。

c、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源。

d、紫外线消毒 。灭菌的方法:

a、灼烧灭菌

b、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h

c、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min

这些方法呢，都会在我们后面的实验中用到，所以大家要详细的看一下课本中它们的使用方法。

回答：防止杂菌污染

小组讨论

总结

关于微生物的实验培养的一些基础知识呢就讲完了，下节课呢，我们就要进入实验室正式开始我们的微生物培养了，所以大家要提前预习一下课本。这节课就到这里，下课！