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2015-07-16
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一实验目的
初步掌握观察DNA 和RNA 在细胞中分布的方法。
二.实验材料、用具
材料:人的口腔上皮细胞。
用具:大小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,显微镜,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸。
试剂:质量分数为09 % NaCI 溶液,保持口腔上皮细胞的正常生理形态。质量分数为8 %的盐酸、蒸馏水。
三.实验原理
1 甲基绿和毗罗红两种染色剂对DNA 和RNA 的亲和力不同,甲基绿使DNA 呈现绿色,毗罗红使RNA 呈现红色。利用甲基绿和毗罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA 和RNA 在细胞中的分布。
2 .盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA 与蛋白质分离,有利于DNA 和染色剂结合。
四方法步骤
越取臼月空上皮细胞制片
( l )滴:在洁净的载玻片上,滴一滴质量分数为让9 %的NaCI 溶液。( 2 )刮:用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下。( 3 )涂:把牙签上附有碎屑的一端,放在载玻片的液滴中涂抹几下。( 4 )烘:点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
2 水解
( l )解:在小烧杯中加人30mL 质量分数为8 %的盐酸,将烘干的载玻片放人小烧杯中水解。
( 2 )保:在大烧杯中加人30 ℃ 温水。将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温smin (如下图所示)。
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3 冲洗涂片
( l )冲:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片105 。
( 2 )吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4 染色
( l )染:将毗罗红甲基绿染色剂滴2 滴在载玻片上,染色smin 。
( 2 )吸:吸去多余染色剂。
( 3 )盖:盖h 盖玻片。
5 观实
( l )低:先用低倍镜找到染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰。( 2 )高:再用高倍镜观察细胞核和细胞质的染色情况。
五注意事项
恨椒翅的选挤
( 1 )选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察。
( 2 )常用的观察材料有人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶内表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)。
2 取材要点
( l )取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质。( 2 )取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。
3 冲洗
冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。
4 安全要点
( l )用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂。
( 2 )烘烤后的载玻片不要马上放人盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1 分钟。5 褥焦
换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,不要转动粗准焦螺旋。
六实验结果及分析
选用材料歉瓢篡糯
细胞核的颜色
细胞质的颇色
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