【解析】(1)用同种限制酶切割质粒和含有htPA基因的DNA片段可产生相同的黏性末端，便于构建基因表达载体;通常采用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否已插入受体细胞DNA。

(2)为获得更多的卵母细胞，通常对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵;采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。

(3)通常用显微注射法将重组表达载体导入动物的受精卵;为了获得母羊，移植前需要对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定;早期胚胎细胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技术获得多个转基因个体。

(4)ht—PA基因的表达产物为人组织纤溶酶原激活物，若在转基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物，说明目的基因成功表达。

(海南卷)31[生物—选修3：现代生物科技专题](15分)

下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。

请据图回答：

⑴获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在 酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在 作用下合成双链DNA，从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的 氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的 序列，再通过化学方法合成所需基因。

⑵利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有 、 、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。

⑶由A和载体B拼接形成的C通常称为 。

⑷在基因工程中，常用Ca2+处理D，其目的是 。

【答案】(1)逆转录酶 DNA聚合酶 氨基酸 脱氧核苷酸 (2)引物 (目的基因或A基因)模板 (3)基因表达载体 (4)使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子

【解析】(1)利用逆转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子;根据蛋白质工程合成目的基因 的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成。(2)PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。(3)目的基因和运载体结合，形成基因表达载体。(4)有利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca2+处理，使之成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子

(上海卷)(九)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)

pIJ702是一种常用质粒(图20)，其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因，mel

是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、

PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。

67.质粒DNA分子中的两条链靠_______键维系成双链结构。

【答案】氢