15.A  解析：消毒指用比较温和的方法杀死微生物的营养细胞，适用于那些不耐高温的液体。如牛奶、果汁、酱油，这样可以使其中的营养成分不被破坏。另外对要求不是很严格的皮肤、饮用水也用消毒的方法处理。而对于严格要求的接种环、手术刀等必须进行灭菌处理。

16.下表所示为某微生物培养基的配方。下列说法中，不正确的是(   )

A.此培养基属于液体培养基，其中的碳源是(CH2O)

B.配制培养基时，溶化后分装前，必须要进行的是调整pH和灭菌

C.倒平板时，一般需冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近操作

D.若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去青霉素，应加入的碳源是纤维素粉

16.D 解析：此培养基中没有琼脂等凝固剂，属于液体培养基。若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是青霉素和(CH2O)，应加入的碳源是纤维素粉。配制培养基时，在溶化后分装前，必须要进行的是调整pH和灭菌，这是最关键的一个环节。倒平板时，要求温度适中、无菌操作，故需冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近操作。

17. 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中，错误的是(  )

A.培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和碳源

B.对培养基进行灭菌，应该采用的方法是高压蒸汽灭菌

C.观察细菌培养的实验时，最好同时在另一平板上接种清水作为对照进行实验

D.若提高培养基中NaCl的浓度，可用于筛选耐盐细菌，这种培养基称为选择性培养基

17.D解析：主要考查了微生物的四大营养物质、选择性培养基、无菌技术及其培养过程。微生物生长需要的营养物质一般含有碳源、氮源、水和无机盐四大类。选择性培养基一般是在微生物培养过程中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长和繁殖的培养基。对培养基一般采用高压蒸汽灭菌的方法。为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验

18.在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。下面是培养基的配方中部分成分：NaN03、KH2P04、NaH2P04、MgSO4·7H20、KCl、H20。在实验室里进行微生物培养时，进行接种过程如下图所示，则下列说法中错误的是(    )

A.此图是采用了平板划线法对微生物进行接种

B.每次划线前要对接种环进行灼烧、冷却后从上一区划线末端开始划、首尾区不重叠

C.若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述NaN03成分即可

D.若用于培养纤维素分解菌，应加入纤维素粉物质。

18.C  解析：从题中可知，若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述NaN03成分,另外还需并加入葡萄糖和尿素物质，其中两者分别是补充碳源和做选择培养用。为达到把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面这一目的，操作上应注意每次划线前要灼烧、冷却后从上一区划线末端开始划、首尾区不重叠

二、非选择题(共60分)

19.(8分)下表是一种培养基的配方，请回答：

⑴此培养基从物理性质来说，属于           培养基。

⑵无菌操作是微生物培养最基本的要求，其中灭菌的主要目的是                 。对于培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是      (填代号)。

①化学消毒    ②灼烧灭菌      ③干热灭菌

④紫外线灭菌  ⑤高压蒸汽灭菌  ⑥巴氏消毒法

⑶每次在灼烧接种环后，为什么要等其冷却后再进行划线?

⑷用稀释涂布平板法统计菌落数目时，一般选择群落在       的平板进行计数。在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2ml，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的菌落数为                     。

⑸以尿素为唯一氮源的培养基中加入             指示剂。培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将              ，利用这一特点，可准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。

19.(8分每空1分)⑴固体  ⑵使用强烈的理化因素杀死体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 ⑤③②①④⑥ ⑶以免接种环温度太高，杀死菌种  ⑷30-300   2.5 107      ⑸酚红  变红

解析：主要考查了培养微生物的培养基的种类、灭菌与消毒、接种和纯化菌种、菌种鉴定等知识。固体培养基一般加入琼脂等凝固剂。灭菌的主要目的是使用强烈的理化因素杀死体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，从而达到无菌培养微生物的目的。每次在灼烧接种环后，要等其冷却后再进行划线，主要目的是以免接种环温度太高，杀死菌种。

20.(10分)微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的。请回答：

(1)培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中加的唯一氮源为             ，这种培养基称为        培养基。

(2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，为什么要将平板倒置?

(3)微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和              法。在用平板划线法接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?

在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗?为什么?

20.(10分  除特殊说明外，其余每空1分)

(1)尿素  选择 (2)皿盖上会凝有水珠，防止水珠落人培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好挥发(2分) (3)稀释涂布平板    第一步灼烧接种环是防止接种环上有其它微生物而污染培养基(1分)。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落(2分)  划线结束后仍要灼烧接种环(1分)，以免菌种对环境造成污染(1分)。

解析：从土壤中分离出分解尿素的细菌，需用选择性培养基，唯一的氮源是尿素。接种过程中，最常用是平板划线法和稀释涂布平板法两种方法。每次划线前都要灼烧接种环的目的是杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落。操作的第一步和最后一步需灼烧接种环的目的分别是防止接种环上有其它微生物而污染培养基、以免菌种对环境造成污染。

21.(9分)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

⑴培养基中除含有蛋白胨、淀粉之外，培养基还必须含有的基本成分是____  和_    。

⑵对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______     。

⑶为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

⑷培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

⑸如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐            细菌，这种培养基被称为              。

21.(9分每空1分) ⑴无机盐  水 ⑵高压蒸汽灭菌 ⑶恒温培养箱 无菌水⑷多  高 ⑸盐(或NaCl)  选择性培养基

解析：熟记微生物的营养、培养基、灭菌的方法是关键。蛋白质中含有氮元素和碳元素，为细菌的生长提供了氮源和碳源，而淀粉只能提供碳源。培养基一般采用高压蒸汽灭菌进行灭菌。不同的微生物形成的菌落不同，有多种菌落即有多种细菌;污染越重，菌落总数就越多。耐盐细菌可以在高浓度的NaCl培养基中生存，而其它的细菌则很难生存。

22.(2009广东雷州调研 15分)以下是证明食物腐败是由细菌引起的实验，阅读这段材料和图示，请回答：

①把碎肉或大豆加水煮烂，用两层纱布滤取肉(豆)汤备用。

②在3只三角瓶里各注入50ml肉(豆)汤，第3个瓶用装有S型弯玻璃管的药棉瓶塞塞住。(如图所示)

③把3只三角瓶放入盛水的锅里隔水加热，使锅里的水沸腾5min，取出3只三角瓶，冷却后放在温暖的阴暗处(日平均温度在20℃以上)。

④以后逐天观察肉汤的变化。结果一天后，不加塞三角瓶里的肉汤已混浊，液面有一层薄膜，这是细菌的群体。瓶内可能有臭味，说明肉汤已腐败。加药棉瓶塞三角瓶的肉汤几天后也开始腐败。加药棉瓶塞和S型玻璃管的三角瓶维持时间最长，但肉汤也最终腐败。

⑴本实验中有实验对照吗?

⑵加药棉塞三角瓶内肉汤几天后为什么也开始腐败?

⑶从第1个瓶中取培养液分离培养某细菌，在105稀释度下涂布出3个平板上菌落数的平均值是56，那么每克样液中的菌落数是                     。(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml)有人模拟了牛肉汤的成分，按下表制备了某培养液，请回答：

⑷若用于培养微生物，一般培养液中应有水、        、        、无机盐四类营养物质，此培养液可培养的微生物同化作用类型是                。

⑸若将此营养液中的①换成葡萄糖，接种酵母菌后用保鲜膜封住试管口，则酵母菌细胞的呼吸方式为              ，反应式                                   ，观察到试管的变化是                          (写出一点，合理即可)。

⑹若用该培养液培养纤维素分解菌，①应改为                。观察菌落形态，还应加入              。为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入           ，将呈现            。

⑺此培养液若用于植物组织培养，还应加入            和              。

22.(12分  每空1分)⑴有  ⑵加有棉塞的三角瓶，尽管细菌进入机会减少但也很难防止细菌侵入，同时由于灭菌不彻底，留在瓶内的细菌芽孢可能繁殖  ⑶菌落数=(56÷0.1)×105=6.3×107个        ⑷碳源  氮源  异养型  ⑸无氧呼吸  C6H12O6—酶→ 2C2H5OH(酒精)+2 CO2+能量  试管内气体增多，保鲜膜凸出 ⑹纤维素  琼脂  刚果红  菌落周围出现透明圈  ⑺琼脂  蔗糖、Mg2+ 等

23.(18分)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

⑴②中培养目的菌株的选择培养基中应加入              作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基          (A.影响;B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用             法。

⑵④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于

;使用                 法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养?

⑶如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?

⑷实验过程中如何防止其它微生物的污染?

23. (18分  除特殊说明外，其余每空1分)

⑴苯酚   影响  稀释涂布平板法  ⑵⑤培养基的中加入苯酚作为碳源，④没有加入(2分)   稀释涂布平板法或平板划线法   以防止培养基冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基(2分)

⑶5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基(加等量的苯酚，用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH值，用苯酚调试使它们的pH值相等，苯酚是唯一的碳源)→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同的时间→再用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH值(4分)  苯酚显酸性，不同菌株的菌种降解苯酚的能力不同，5支瓶内培养基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH试纸检测这5支瓶内培养基的pH值，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小(2分)

⑷从制备培养基到接种与培养等全部实验过程保持无菌操作：a.对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒;b.将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行灭菌;c.实验操作应在酒精灯的火焰附近进行;d 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触(4分)

解析：本题以实验材料作为背景考查微生物培养及相关实验分析和设计能力等。根据实验目的知，从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，说明苯酚是该种细菌的碳源。如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?该问中应注意自变量为不同菌株，苯酚的浓度是无关变量。由于苯酚显酸性，不同菌株的菌种降解苯酚的能力不同， pH值会不同。可考虑用pH试纸来检测作为因变量。实验中为防止微生物污染，应从制备培养基到接种与培养等全部实验过程保持无菌操作，如用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行灭菌等。

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